1) 液相色谱法，是使用手性色谱柱和可变波长紫外检测器，对试样的L体和D体乳酸进行分离测定，可精确计算出两种异构体各占的比例。
2) 比旋光度法，是一定波长与温度下，用平面偏振光通过具有光学活性的物质，对于引起的旋转度数即旋光度进行测定。比旋光度测定不仅与物质的结构有关，也与溶液的浓度、溶剂、盛液管长度、温度及所用光的波长等有关。
3) 乳酸由于其特殊的分子结构，其溶液易发生自酯化作用，达到一定的浓度后，其溶液组成有单体乳酸、聚乳酸，若不对样品进行处理及固定分析条件，对旋光度的测定将形成干拢，造成结果稳定性差。因此国际上逐渐使用液相色谱法，而不使用比旋光度法。
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